RNA ve ligandların karakterizasyonu, özellikle de nanopartikül bazlı terapötiklerde, tarihsel olarak karmaşık bir süreç olmuştur. Lipid nanopartikülleri (LNP’ler), RNA’yı ve yükleri çevreleyen yapılar, doğası gereği bulanık olup bu durum, UV/Vis spektrometrelerinin yaygın olarak kullanıldığı yaşam bilimleri endüstrisinde analizi zorlaştırmaktadır.
Marama Labs, bulanık örneklerdeki ışık saçılmasını ortadan kaldıran bir teknoloji geliştirmiştir. Brendan Darby, PhD, Marama Labs’ın kurucu ortaklarından ve CEO’su, bu teknolojinin “karmaşık parçacık analizinde büyük yetenekler sunuyor” diyor.
CloudSpec olarak adlandırılan bu teknoloji, çözeltinin bulanıklığından kaynaklanan sinyal parazitini ortadan kaldırarak temiz ölçümler elde etmeyi sağlıyor. Darby ve ekibi, ışığın saçılmasını engelleyen yansıtıcı bir küresel oda olan entegre küre ve analit konsantrasyonlarını doğru bir şekilde ölçmek için bir algoritma geliştirdiler. Bu sayede, standart bir spektrometredeki gibi temiz sonuçlar elde ediliyor. Bu cihaz kullanılarak, LNP lizisi ve floresan boyaları kullanılmadan yük miktarı belirlenebiliyor.
Victoria Üniversitesi (Yeni Zelanda), University College Cork (İrlanda) ve Marama Labs’ten araştırmacılar, bu analiz yönteminin floresansa dayalı kantifikasyon testlerine göre daha hassas olduğunu ve beklenen RNA konsantrasyonlarıyla daha uyumlu sonuçlar verdiğini gösterdiler.
CloudSpec, 240 ila 850 nm arasındaki spektral aralıkta “beklenen RNA konsantrasyonu için nominal değerin %10’undan az” sonuçlar veriyor. Darby ayrıca, “Bu teknik çok hassas” diye ekliyor. Ayrıca hızlı ve kullanımı kolay. Sadece örnek seyreltmesi gerekiyor ve ölçüm sadece 15 saniye sürüyor.
Diğer teknolojiler ise genellikle sekiz ila on adım gerektirir ve her bir örneğin analizi 30 dakika ile iki saat arasında sürebilir, bu da önemli değişkenliklere yol açabilir.
Fizik, şarap ve RNA
Bu yenilikçi kantifikasyon teknolojisi fikri, Darby’nin Eric Le Ru, PhD liderliğindeki RAMAN Lab’deki doktora çalışmaları sırasında ortaya çıkmıştır. “Nanopartiküllerin ışıkla nasıl etkileşimde bulunduğunu temel bir fizik perspektifinden anlamaya çalışıyorduk” diyor Darby. “Saçılma ve absorpsiyon ile ilgili nanopartiküllerin temel optiğini inceliyorduk ve denediğimiz ölçümlerin mevcut cihazlarımızla imkansız olduğunu fark ettik. Işık saçılmasının ölçümlerde büyük bir hata kaynağı oluşturduğunu anladık.”
“Çoğu sıvı doğası gereği bulanıktır, ancak laboratuvarlarda saflaştırılmadığı sürece. Aynı kalite ve tekrarlanabilirliği UV/Vis ile elde ettiğimizde, işlenmemiş örneklerde de bunu başardığımızda, bu teknolojinin karmaşık örneklerin karakterizasyonu için altın standart haline gelebileceğini hemen anladık” diyor Darby. UV/Vis, hem saçılımı hem de absorpsiyonu ölçerken, CloudSpec ise saçılımı ve absorpsiyonu doğrudan ölçerek saçılım miktarını belirleyerek çalışır.
Bu noktada, Darby, Le Ru ve Matthias Meyer, PhD (CTO ve kurucu ortak), Marama Labs’i kurma sürecine başladılar.
Darby’nin doktora araştırması sırasında, metalik nanopartiküllerin yüzeyindeki molekülleri daha önce ölçülemeyen ultra düşük konsantrasyonlarda doğru bir şekilde ölçtüler. Bu bulgu, RNA terapötiklerine genişletildi ve CureVac araştırmacıları ile işbirliği içinde doğrulandı.
Ancak başlangıçtan itibaren ekip, CloudSpec’in en büyük katkılarının yaşam bilimlerinde olacağını ancak ilk uygulamalarının Yeni Zelanda şarap endüstrisinde olacağını biliyordu. “Şu anda odağımız yaşam bilimleri ve RNA terapötikleri” diye vurguluyor.
Formülasyon geliştirme, kalite kontrol ve üretim süreçlerinde
CloudSpec teknolojisi şu anda tek parametreli olup sadece RNA ve hedef ligand konsantrasyonlarını ölçmektedir. Ancak bu önemli parametrelerin yanı sıra, biomanufacturer’ların ölçmesi gereken nanopartiküllerin boyutu, dağılımı ve yüzey yükü gibi kritik kalite parametreleri de bulunmaktadır.
Bu nedenle, Darby, CloudSpec’e yakında “LNP formülasyonlarında en çok kullanılan özelliklerden birinin” ölçüm yeteneğinin eklenmesinin mümkün olabileceğini belirtiyor. “Bu ölçümün şirket içinde gösterildiği ve doğrulandığı için, mevcut yöntemden daha hızlı ve tekrarlanabilir sonuçlar elde edebiliyoruz. Sadece ek özellikler eklemekle kalmıyoruz” diyor. Hangi yeni özelliğin ekleneceği o dönemde açıklanmadı.
Teknolojisini geliştirmeye devam ederken Marama Labs aynı zamanda küresel varlığını da genişletiyor. Temel araştırma ve geliştirme ekibi ile üretim tesisleri Wellington, Yeni Zelanda’da bulunmaktadır. Darby, şirketin ticari ve stratejik gelişimini Dublin ofisinden yönetmektedir. Şirket ayrıca büyüyen müşteri tabanına destek olmak için Boston’da bir ofis açmıştır.
Bu yapılandırma, şirketin hem Avrupa hem de Kuzey Amerika pazarlarına erişimini sağlarken aynı zamanda inovasyon ekibiyle yakın ilişkisini sürdürmektedir. Böylece LNP analizinin yapıldığı her yerde “bulutları aşma” imkanı sağlanmaktadır.
Kaynak:
Bu gelişme hakkında düşüncelerinizi, donanım deneyimlerinizi veya sorularınızı Topluluk Forumumuzda paylaşın.
Foruma Katıl & Yanıtla ➔
İlk yorumu siz yazın
Fikrinizi bir kaynak, soru veya yapıcı karşı görüşle geliştirin.